紫外可见分光光度计检测食品中的酶活性【PG电子平台】

本文摘要:酶在食品加工中的起到就像一把双刃剑,我们要趋利避害。酶的大力起到我们要强化,在食品加工过程中加到酶制剂,使其起到充分发挥;消极起到我们要尽量避免,可以通过冷却等方法将酶灭活,避免其有利影响。 为了将酶更佳地应用于食品加工,研究酶的性质是十分必要的。而紫外-可见分光光度法是研究酶性质的最重要方法之一。下面我们来讲解用-可见分光光度计测量酶活的具体方法。 紫外-可见分光光度法测量酶活性: 1.半乳糖苷酶 一一半乳糖苷酶,又称乳糖酶(Lactase)。

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酶在食品加工中的起到就像一把双刃剑,我们要趋利避害。酶的大力起到我们要强化,在食品加工过程中加到酶制剂,使其起到充分发挥;消极起到我们要尽量避免,可以通过冷却等方法将酶灭活,避免其有利影响。

  为了将酶更佳地应用于食品加工,研究酶的性质是十分必要的。而紫外-可见分光光度法是研究酶性质的最重要方法之一。下面我们来讲解用-可见分光光度计测量酶活的具体方法。

  紫外-可见分光光度法测量酶活性:  1.半乳糖苷酶  一一半乳糖苷酶,又称乳糖酶(Lactase)。能水解乳糖来减少乳制品的乳糖含量,从而提升乳制品的可消化性,用作较低乳糖牛奶和非结晶型稀释牛奶的生产及奶酪风味的转变,同时还可用作生产低聚半乳糖。  【酶活测量】以ONPG为底物测量-半乳糖苷酶活力。

  【酶活定义】以ONPG为底物,37℃保温酶解法,每分钟获释lmol/L邻硝基酚的酶量,定义为1个酶活力单位。  2.超氧化物歧化酶  超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,全称SOD)是一种十分最重要的生物体避免水解受损的酶类,是生物体内超氧阴离子清除剂,维护细胞免遭受损。

SOD普遍不存在于各类生物体内,所有好氧微生物细胞中都所含SOD。自1969年Mccord等人首次找到了SOD生物活性后,医学界对其医疗起到做到了许多研究,证明它具备抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、外用坏死、提升人体免疫力等起到,被专家称作21世纪最有前途的药用酶。

欧美国家已开始将其应用于医疗、食品、保健、化妆品等领域。  【酶活测量】在25℃4.5ml50mmol/LpH8.3的K2HPO4-KH2PO4缓冲液中重新加入待测SOD样液,再行重新加入10ul50mmol/L的连苯三酚,很快摇匀,推倒人光径lcm的比色杯,在325nm波长下间隔30s测一次A值。

同时测量Sigma公司的SOD标准品,对所测样品SOD活性展开校正。  【酶活定义】在lml反应液中,每分钟诱导连苯三酚自水解速率约50%时的酶量为一个酶活单位,即325nm0.035OD/min为一个酶活单位。  3.多酚氧化酶  多酚氧化酶(PPO)是一类由核基因编码在细胞质中制备的含铜质体的金属酶,其起到机理在于铜的水解-还原作用。

大麦中的多酚物质经过PPO的催化剂水解后,具备单宁性质,不易和蛋白质起交联起到而溶解出来,进而影响啤酒的色泽、泡沫、风味和非生物稳定性。大麦中部分PPO以潜入状态不存在,在浸麦过程中,可通过除去一些酶抑制剂、蛋白酶起到或其他的一些方式使其活性在浸麦过程中提升。

在大麦幼苗过程中,PPO的活力较高,影响着麦芽的质量。因此,在制麦过程中应当减少PPO活性。  【酶活测量】0.1mL酶液与lmL0.1mol/L邻苯二酚(用pH8.4柠檬酸-磷酸缓冲液提炼)80oC反应3min,用2mL20%TCA中止反应,于波长450nm处用分光光度计测量吸取值。


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